视网膜类器官方案在长达数月的维持阶段依赖于 FBS,这为本已漫长且敏感的分化过程增加了批次间的变异性。
在 Sunnybrook 研究所人类干细胞与类器官平台,适用于悬浮细胞的 YEX在已发表的视网膜类器官方案(Harkin 等人,PNAS 2024)的维持阶段替代了 FBS。类器官在第 30 天时与已发表方案的结果相符,且在第 90 天时包含了所有主要的视网膜细胞类型,包括成熟的光感受器。
数据来源:Sunnybrook 研究所人类干细胞与类器官平台,2026 年。
类器官在 YEX 中持续培养至分化第 90 天
第 90 天检测到光感受器、双极细胞、神经节细胞、无长突细胞和米勒胶质细胞
形态学和标志物染色结果与已发表方案一致

在第 90 天,维持在 YEX 中的类器官包含光感受器、双极细胞、神经节细胞、无长突细胞和米勒胶质细胞。

视网膜类器官在 YEX 中发育至第 90 天。
从分化第 16 天起逐步加入适用于悬浮细胞的 YEX:第 16 天为 1%,第 18 天为 3%,第 20 天为 5%,第 22 天起在 ARDM 中维持 10%。请仅在维持阶段使用 YEX;若从贴壁阶段起即用 YEX 替代 FBS,第 90 天时的视网膜组织会减少。